SCDLP液體培養基是如何進行制備的?

2022-01-12 14:10:28  微生物基本知識

SCDLP液體培養基是如何進行制備的?

1.準備溶液

在容器中加入一部分所需量的水,按照培養基的配方稱取各種原料,依次加入使其溶解,后補足所需的水。蛋白胨、肉醬等物質需要加熱溶解,加熱時蒸發的水分在所有原料溶解后再加水。

準備固體培養基時,先將準備好的SCDLP液體培養基煮沸,然后加入稱好的瓊脂,繼續加熱至完全融化。繼續攪拌,避免燒壞瓊脂糊底部。

2.調節酸堿度

用pH試紙(或pH電位計或氫離子濃度比色計)測試培養基的pH值。如果不符合要求,可以用10%鹽酸或10%氫氧化鈉調節,直到配方要求的酸堿度調節完

3.過濾

趁熱用濾紙、紗布或棉花過濾準備好的培養基。用紗布過濾時,好折疊成六層。用濾紙過濾時,可將濾紙折疊成瓦棱柱狀,鋪在漏斗上過濾。

4.包裝

過濾后的SCDLP液體培養基應分開包裝。如果要制作傾斜培養基,需要將培養基分成試管。如果要制作平板培養基或液體或半固體培養基,培養基應裝在錐形瓶中。

包裝時,一只手松開彈簧夾,使培養基流出,另一只手握住幾個試管或錐形瓶,依次拿起培養基。包裝時注意不要使培養基粘附在管口或瓶口,以免浸泡棉條造成雜菌污染。

裝入試管的培養基量取決于試管和錐形瓶的大小和需要。一般制作斜面培養基時,每根15150 mm試管裝3 ~ 4 ml左右(1/4 ~ 1/3管高),如果制作深層培養基,每根20220 mm試管裝12 ~ 15 ml左右。每個錐形瓶中填充的介質通常是其體積的一半。

5.添加棉塞

分裝后,需要用棉塞塞住管口或瓶口。棉塞的主要用途是過濾空氣,避免污染。棉塞應使用普通的新鮮干棉,不能使用脫脂棉,以免脫脂棉吸水而不使用棉塞。

制作棉塞時,根據棉塞的大小將棉花鋪成合適的厚度,抓一片手掌,鋪在左手拇指和食指形成的圓孔中,右手食指插入棉塞中間,同時左手食指和拇指稍握,就會形成一個長條狀的棉塞。

棉塞制作完成后,應迅速插入管口或瓶口,棉塞應緊貼內壁,不留縫隙,防止空氣中的微生物沿褶皺侵入。棉塞不應太緊或太松。衛生棉條堵塞后,便攜式衛生棉條、管子和瓶子不要掉落是合適的。棉塞的三分之二應該在管子或瓶子里,上端露出一點棉花便于拔出。試管和塞有棉塞的圓錐形瓶子應蓋上厚紙,用繩子捆綁消毒。

6.制作斜面培養基和平板培養基。

培養基滅菌后,如斜面培養基和平板培養基,應在培養基固化前進行。